本文系統介紹Bio-Rad Amersham ImageQuant 800全自動Western blot檢測系統的技術創新。重點分析其高動態范圍CCD檢測系統、多色熒光檢測能力和智能化分析軟件,探討如何在保持Western blot特異性的同時實現精準定量和高效通量。
正文:
傳統Western blot技術長期受限于定量準確性差、操作流程繁瑣等問題。Bio-Rad Amersham ImageQuant 800系統通過技術創新,實現了Western blot實驗的自動化、定量化和高通量化。
該系統采用深度制冷的科學級CCD傳感器,動態范圍達到4.8OD,可同時檢測強信號和弱信號而不需要多次曝光。配合多激光光源系統,支持Cy2、Cy3、Cy5三種熒光通道的同時檢測,實現多重蛋白質分析。實驗數據顯示,其線性范圍比化學發光法擴大100倍,定量準確性提高5倍以上。
在自動化方面,系統集成自動對焦、自動曝光和自動圖像拼接功能,可連續處理多達100個膜而不需人工干預。智能分析軟件采用機器學習算法,自動識別條帶、扣除背景并進行歸一化分析,將數據分析時間從數小時縮短至分鐘級。
應用研究表明,在磷酸化蛋白質定量分析中,該系統可準確檢測到1.5倍以下的表達差異,遠優于傳統方法的2倍檢測限。在細胞信號通路研究中,多色熒光檢測功能允許在同一張膜上同時檢測總蛋白和磷酸化蛋白,不僅節省樣品,更提高了數據可比性。
關鍵詞: Western blot、蛋白質定量、多色熒光、自動化檢測、圖像分析