槍頭選擇與適配:優先使用 Eppendorf 原裝低吸附槍頭(如貨號 0030073124,10 μL 規格),其內壁經特殊硅化處理,液體殘留量<0.1 μL,避免微量樣品損失,需將移液器槍頭錐部對準槍頭管口,輕輕旋轉按壓,確保密封(可聽到 “咔嗒" 聲),避免因密封不嚴導致的體積偏差(偏差可達 2%-3%)。
吸液與排液速度控制:采用 “慢吸慢排" 原則 —— 吸液時,將按鈕緩慢按至第一停點(量程設定點),等待 1-2 秒(尤其黏稠樣品,如甘油溶液),確保液體吸入槍頭;排液時,先將槍頭貼壁(與容器壁呈 10°-15° 角),緩慢按至第一停點,停留 1 秒后繼續按至第二停點,排出殘留液體,避免微量樣品殘留(如 0.1 μL 殘留對 1 μL 移液的誤差影響達 10%)。
量程調節技巧:調節量程時,需遵循 “從大到小" 原則(如從 10 μL 調至 2 μL,直接逆時針旋轉旋鈕至 2 μL;若需從 2 μL 調至 10 μL,需先調至 15 μL 再回調至 10 μL),避免旋鈕過度旋轉導致內部齒輪磨損,影響精度。同時,禁止將量程調至超過移液器的最大量程(如 10 μL 移液器調至 11 μL),否則會損壞活塞密封件。
重心控制與姿勢:利用 Eppendorf 移液器的人體工學手柄設計(重心與手指握持點重合),握持時手掌自然貼合手柄,手腕保持水平,避免彎腰或聳肩操作(長期可導致手腕勞損)。移液時,以肘部為支點,帶動手臂移動,而非僅靠手指發力,減少操作疲勞的同時,確保移液路徑穩定,體積偏差<0.5%。
多通道移液器的一致性控制:使用 Eppendorf 8 通道 / 12 通道移液器(如 Research® plus 8 通道,50-300 μL)時,需確保所有槍頭同時安裝到位(可將移液器垂直扣在槍頭盒上,一次性按壓安裝),避免因個別槍頭密封不嚴導致的通道間偏差(偏差>1%)。移液后,可通過觀察各孔液體高度是否一致,驗證通道一致性,若發現偏差,及時更換槍頭重新操作。
黏稠樣品(如甘油、蛋白溶液):吸液時,將按鈕按至第二停點(而非第一停點),緩慢吸入樣品,停留 3-5 秒(讓樣品充分流入槍頭),排液時同樣緩慢按至第二停點,避免因樣品黏稠導致的體積不足(傳統操作易導致 10%-15% 的體積偏差)。同時,選擇大口槍頭(如 Eppendorf 1000 μL 大口槍頭),減少樣品流動阻力。
揮發性樣品(如乙醇、丙酮):此類樣品易揮發導致槍頭內壓力變化,需快速完成吸液與排液操作(總時間<5 秒),且排液時確保槍頭接觸液面(避免樣品揮發后體積減少)。若需多次移取,建議每移取 3-5 次后,重新校準移液器(使用 Eppendorf 校準工具),確保精度。
腐蝕性試劑(如強酸、強堿):使用 Eppendorf 抗腐蝕移液器(如 Research® plus Corrosion-Resistant 系列),其槍頭錐部采用 1.4404 特種不銹鋼材質,可耐受 98% 硫酸、37% 鹽酸。操作時需佩戴手套,避免試劑接觸移液器主體(若不慎接觸,立即用 70% 乙醇擦拭),且移液后及時更換槍頭,避免試劑殘留腐蝕槍頭錐部。
外部清潔:每日實驗結束后,用 70% 乙醇擦拭移液器主體(尤其是手柄、按鈕、槍頭錐部),去除樣品殘留(如蛋白、核酸),避免殘留樣品干燥后堵塞槍頭錐部或腐蝕材質。若接觸過放射性或有毒樣品,需使用專用消毒劑(如含氯消毒劑)擦拭,再用超純水清潔,最后用 70% 乙醇消毒。
內部清潔與滅菌:若移液器內部被樣品污染(如樣品倒吸進入移液器),需拆解移液器(參照 Eppendorf 拆解指南),用超純水沖洗內部活塞、彈簧等部件,晾干后重新組裝。對于需要無菌操作的場景(如細胞培養),可將移液器槍頭錐部拆下,進行 121℃高壓滅菌(20 分鐘),滅菌后晾干再安裝使用(Eppendorf Research® plus 系列的槍頭錐部支持高壓滅菌,其他部件禁止滅菌)。
校準周期:普通實驗場景(如常規移液)每 6 個月校準 1 次;高頻使用(如每日移液 100 次以上)或接觸腐蝕性試劑的場景,每 3 個月校準 1 次。校準需使用 Eppendorf 原裝校準工具(如貨號 0030108556 校準套裝),或委托 Eppendorf 服務團隊進行專業校準(符合 ISO 8655 標準)。
簡易校準方法(實驗室自查):使用分析天平(精度 0.01 mg)、超純水(25℃,密度 1 g/mL)進行自查 —— 設定移液器量程(如 100 μL),移取超純水至稱量皿中,記錄重量,重復 5 次,計算平均值與理論值(100 mg)的偏差,若偏差>±1%,需進行專業校準。
槍頭適配:優先使用 Eppendorf 原裝槍頭,其與移液器槍頭錐部的配合間隙<0.001 mm,確保密封精度,避免因非原裝槍頭的尺寸偏差導致的體積誤差(偏差可達 3%-5%)。上海易匯生物提供 Eppendorf 原裝槍頭的現貨供應,當日下單次日送達,可避免因槍頭短缺導致的實驗中斷。
濾芯更換:對于配備疏水濾芯的移液器(如 Research® plus 帶濾芯系列),當移取易污染樣品(如病毒、細菌)后,需及時更換濾芯(Eppendorf 原裝濾芯貨號 0030073185),避免樣品進入移液器內部造成交叉污染。建議每移取 50 次污染樣品更換 1 次濾芯,常規樣品每 3 個月更換 1 次。
禁止超量程使用:嚴格按照移液器的量程范圍操作(如 10 μL 移液器禁止移取 11 μL 樣品),超量程會導致內部活塞過度拉伸或壓縮,損壞密封件,影響精度(修復成本可達設備價格的 30%)。
禁止槍頭未安裝時按壓按鈕,按壓按鈕會導致活塞直接暴露,若有灰塵或雜質進入,會磨損活塞表面,導致密封不良(表現為移液體積偏差突然增大)。
禁止移液器倒置或傾斜存放:移液后若槍頭內殘留液體,倒置或傾斜存放會導致液體流入移液器內部,腐蝕電路(電動移液器)或彈簧(手動移液器),建議使用 Eppendorf 移液器支架(如貨號 0030122470)垂直存放。
交叉污染防控:移取不同樣品時,必須更換槍頭,禁止重復使用槍頭(即使移取同一種樣品,也需避免槍頭接觸容器壁后交叉污染)。對于高風險樣品(如病原微生物、有毒試劑),需在生物安全柜內操作,且移液器使用后需進行表面消毒(70% 乙醇擦拭)。
人員防護:移取腐蝕性、揮發性試劑時,需佩戴手套、護目鏡,避免試劑接觸皮膚或吸入揮發氣體。若試劑不慎接觸皮膚,立即用大量清水沖洗,必要時就醫。
耗材儲存與管理:Eppendorf 槍頭、濾芯等耗材需存放在干燥、潔凈的環境中(溫度 15-25℃,相對濕度 30%-60%),避免高溫高濕導致耗材變質(如槍頭內壁硅化層脫落)。上海易匯生物的期貨定制服務可根據科研周期提前 30-60 天鎖定耗材產能,確保耗材儲存條件穩定,避免因耗材變質影響實驗。
移液體積偏差增大:
檢查槍頭是否安裝到位(重新安裝并確認密封);
檢查槍頭是否過期或變質(如低吸附槍頭硅化層脫落,可更換新槍頭測試);
檢查移液器是否需要校準(按前文簡易校準方法自查)。
按鈕按壓卡頓:
檢查按鈕是否有樣品殘留(用 70% 乙醇擦拭按鈕與手柄連接處);
檢查內部彈簧是否生銹(若有,需聯系 Eppendorf 維修,禁止自行拆解)。
槍頭無法安裝或拆卸:
檢查槍頭錐部是否有異物(如槍頭碎片,用鑷子小心取出);
檢查槍頭錐部是否變形(若變形,需更換槍頭錐部,建議由專業人員操作)。